結(jié)核感染T細(xì)胞檢測是通過采集外周血檢測特異性T細(xì)胞反應(yīng)來診斷結(jié)核分枝桿菌感染的免疫學(xué)方法,主要用于結(jié)核潛伏感染篩查和活動(dòng)性結(jié)核輔助診斷。檢測原理主要有γ-干擾素釋放試驗(yàn)、結(jié)核特異性抗原刺激試驗(yàn)、T細(xì)胞增殖反應(yīng)檢測、細(xì)胞因子分泌分析和T細(xì)胞表型鑒定五種技術(shù)路徑。
1、γ-干擾素試驗(yàn):
通過結(jié)核特異性抗原刺激T細(xì)胞釋放γ-干擾素進(jìn)行檢測。采用結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群特異性抗原ESAT-6和CFP-10刺激外周血單個(gè)核細(xì)胞,酶聯(lián)免疫吸附法測定γ-干擾素濃度。該方法不受卡介苗接種影響,特異性可達(dá)95%以上,但無法區(qū)分潛伏感染與活動(dòng)性結(jié)核。
2、抗原刺激試驗(yàn):
利用結(jié)核桿菌特異性抗原體外刺激T細(xì)胞。除ESAT-6和CFP-10外,部分檢測還加入TB7.7等抗原,通過酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)計(jì)數(shù)分泌細(xì)胞因子的T細(xì)胞數(shù)量。該方法靈敏度較高,但需要專業(yè)實(shí)驗(yàn)室操作,結(jié)果判讀存在主觀性。
3、增殖反應(yīng)檢測:
測定T細(xì)胞受抗原刺激后的增殖能力。采用氚標(biāo)記胸腺嘧啶核苷摻入法或羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯染色,通過流式細(xì)胞術(shù)分析T細(xì)胞分裂情況。該技術(shù)能反映T細(xì)胞免疫功能狀態(tài),但操作復(fù)雜且成本較高。
4、細(xì)胞因子分析:
檢測多種細(xì)胞因子分泌譜。除γ-干擾素外,還可測定白細(xì)胞介素-2、腫瘤壞死因子-α等細(xì)胞因子,通過多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)或液相芯片技術(shù)實(shí)現(xiàn)。多指標(biāo)聯(lián)合檢測可提高診斷準(zhǔn)確性,但數(shù)據(jù)分析較為復(fù)雜。
5、表型鑒定技術(shù):
分析結(jié)核特異性T細(xì)胞表面標(biāo)記物。采用CD4、CD8、CD45RO等抗體標(biāo)記,結(jié)合四聚體技術(shù)識別抗原特異性T細(xì)胞。該技術(shù)能精確定量結(jié)核特異性T細(xì)胞亞群,但設(shè)備要求高且耗時(shí)長。
進(jìn)行結(jié)核感染T細(xì)胞檢測前需停用免疫抑制劑2周,急性感染期可能出現(xiàn)假陰性。檢測結(jié)果需結(jié)合臨床癥狀、影像學(xué)檢查和痰涂片等綜合判斷。日常應(yīng)注意保持充足睡眠和均衡飲食,適量補(bǔ)充維生素D和蛋白質(zhì)有助于維持免疫功能。結(jié)核高危人群應(yīng)定期篩查,出現(xiàn)持續(xù)咳嗽、低熱、盜汗等癥狀時(shí)及時(shí)就醫(yī)。檢測后陽性者需在醫(yī)生指導(dǎo)下進(jìn)行預(yù)防性治療或規(guī)范抗結(jié)核治療,治療期間需加強(qiáng)營養(yǎng)并定期復(fù)查肝功能。